Wnt-C59 (C59)

製品コード：S7037 純度：99.99%

Wnt-C59 (C59) はルシフェラーゼ (luciferase) を駆動する多量体 TCF 結合部位の Wnt3A を介した活性化に対する PORCN 阻害剤 (HEK293 細胞での IC50= 74 pM) です。

CAS No. 1243243-89-1

東京

北海道

東北

北関東

南関東

東海

北信越

近畿

中国

四国

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10mM (1mL in DMSO) JPY 44500 国内在庫あり

5mg JPY 37000 国内在庫あり

25mg JPY 85500 国内在庫あり

100mg JPY 145500 国内在庫あり

1g JPY 445500 国内在庫なし(納期7~10日)

代表番号: 045-509-1970|電子メール：sales@selleck.co.jp
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PORCN阻害剤の選択性比較

Cell Data

Cell Lines Assay Type Concentration Incubation Time 活性情報 PMID

HEK293T Function assay 22 hrs Inhibition of porcupine in HEK293T cells transfected with Wnt3A-expressing vector assessed as suppression of Wnt/beta-catenin signaling after 22 hrs by Super-top flash reporter gene assay, IC50 = 1 nM. 29630366

HT1080 Function assay Inhibition of porcupine activity (unknown origin) expressed in human HT1080 cells assessed as suppression of Wnt3A-mediated super top flash activity by STF luciferase assay, IC50 = 0.074 nM. 26522946

A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139

SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139

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生物活性

製品説明 Wnt-C59 (C59) はルシフェラーゼ (luciferase) を駆動する多量体 TCF 結合部位の Wnt3A を介した活性化に対する PORCN 阻害剤 (HEK293 細胞での IC50= 74 pM) です。

Targets

Porcn ^[1]
(HEK293 cells )

74 pM

In Vitro

In vitro Wnt-C59 (C59) is claimed to inhibit PORCN enzyme activity at nanomolar concentrations. At 10 nM, it blocks the palmitoylation-dependent Wnt–WLS interaction in HeLa cells transfected with either WNT3A-V5 or WNT8A-V5 plasmids. This compound (100 nM) prevents incorporation of palmitate into WNT3A in HeLa cells transfected with WNT3A-V5, consistent with inhibition of PORCN activity. It (100 nM) inhibits the activity of all splice variants of murine PORCN in PORCN-null HT1080 cells transfected with PORCN. Wnt-C59 is a nanomolar inhibitor of mammalian PORCN acyltransferase activity and blocks activation of all evaluated human Wnts. It does not significantly inhibit the proliferation of any of 46 tested cancer cell lines in vitro at concentrations that completely inhibit PORCN. ^[1] Wnt-C59 is capable to significantly inhibit proliferation and comparable to the ICG-001 treated NMuMG (NMG) cells. It inhibits sphere formation by threefold in NMuMG (NMG) cells, which is dependent on Wnt10b-secretion. This compound inhibits proliferation of human MDA-MB 231 cells by >50%. ^[2] As a Porcupine inhibitor, it blocks radiolabel incorporation of [¹²⁵I]iodo-pentadecanoate in mouse L-Wnt3a cells transfected with Flag-Porcupine. ^[3]

細胞実験細胞株 NMuMG (NMG) and MDA-MB 231 cells

濃度 --

反応時間 48 hours

実験の流れ
Seed cells at a concentration of 4×10³/well in 100 μL culture medium containing various amounts of Wnt-C59 (C59). Incubate cells for 48 hours at 37 ℃. Add 10 μL/well cell proliferation reagent and incubate for 4 hours at 37 ℃. Shake thoroughly for 1 min on a shaker. Measure the absorbance of the samples in a microplate (ELISA) reader.

実験結果図 Methods Biomarkers 結果図 PMID

Western blot β-catenin / pPKC 26941358

Q-PCR Cyclin D1 31156379

Growth inhibition assay Cell proliferation Cell viability 25980501

In Vivo

In Vivo Wnt-C59 (C59) concentration remains greater than 10-fold above the in vitro IC50 for at least 16 hours following a single oral dose (5 mg/kg) in mice. At 10 mg/kg, it prevents growth of MMTV-WNT1 tumors in female nude mice orthotopically transplanted with independent MMTV-WNT1 tumors. This compound also decreases Wnt pathway activity and proliferation in such tumors, as evident by reduced expression of β-catenin target genes. ^[1] When topically administered at 10% for 4 weeks, it reduces the size of dysplasia in SmoM2-expressing cells in adult K14CREER/Rosa–SmoM2 mice. ^[4]

動物実験動物モデル Female nude mice orthotopically transplanted with independent MMTV-WNT1 tumors

投与量 10 mg/kg

投与経路 orally

臨床試験 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2024-05-22)

NCT Number Recruitment Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases

NCT02679001 Completed
Rheumatoid Arthritis

Hoffmann-La Roche
March 24 2016 --

参考

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23188502/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23307470/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23416332/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23178882/

+ 展開

化学情報

分子量 379.45 化学式
C₂₅H₂₁N₃O

CAS No. 1243243-89-1 SDF Download Wnt-C59 (C59) SDFをダウンロードする

Smiles CC1=NC=CC(=C1)C2=CC=C(C=C2)CC(=O)NC3=CC=C(C=C3)C4=CN=CC=C4

保管 3年-20°C粉溶液の保管
冷凍と解凍の繰り返しを避けるため小分けにしてください 1年-80°Cin solvent

１ケ月-20°Cin solvent

In vitro
Batch:

DMSO : 76 mg/mL ( (200.28 mM)；吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 76 mg/mL ( (200.28 mM)；吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Ethanol : 19 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 76 mg/mL ( (200.28 mM)；吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 76 mg/mL ( (200.28 mM)；吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

モル濃度計算器

in vivo
Batch:

Add solvents to the product individually and in order.
投与溶液組成計算機

Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Clear solution
5%DMSO 1 40%PEG 300 2 5%Tween80 3 50% ddH2O

この製剤はselleckのラボで検証済みです。上記の溶解方法がご要望を満たさない場合、selleckの営業担当までお問い合わせ頂ければ、個別の試験を行います。
3.800mg/ml (10.01mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 76 mg/ml clear DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Clear solution
5%DMSO 1 95% Corn oil

この製剤はselleckのラボで検証済みです。上記の溶解方法がご要望を満たさない場合、selleckの営業担当までお問い合わせ頂ければ、個別の試験を行います。
3.800mg/ml (10.01mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 76 mg/mL clarified DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Clear solution
5%DMSO 1 40%PEG 300 2 5%Tween80 3 50% ddH2O

この製剤はselleckのラボで検証済みです。上記の溶解方法がご要望を満たさない場合、selleckの営業担当までお問い合わせ頂ければ、個別の試験を行います。
3.800mg/ml (10.01mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 76 mg/ml clear DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

実験計算

モル濃度計算器

質量濃度体積分子量

= × ×

希釈計算器分子量計算器

投与溶液組成計算機(クリア溶液)

ステップ１：実験データを入力してください。（実験操作によるロスを考慮し、動物数を1匹分多くして計算・調製することを推奨します）

投与量 mg/kg 動物平均体重 g 投与体積（動物毎）μL 動物数匹

ステップ２：投与溶媒の組成を入力してください。（ロット毎に適した溶解組成が異なる場合があります。詳細については弊社までお問い合わせください）

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

計算結果：

投与溶媒濃度： mg/ml;

DMSOストック溶液調製方法： mg 試薬を μL DMSOに溶解する（濃度 mg/mL, 注：濃度が当該ロットのDMSO溶解度を超える場合はご連絡ください。 )

投与溶媒調製方法：Take μL DMSOストック溶液に μL PEG300，を加え、完全溶解後μL Tween 80，を加えて完全溶解させた後 μL ddH₂O，を加え完全に溶解させます。

投与溶媒調製方法：μL DMSOストック溶液に μL Corn oil，を加え、完全溶解。

注意：１.ストック溶液に沈殿、混濁などがないことをご確認ください；
２.順番通りに溶剤を加えてください。次のステップに進む前に溶液に沈殿、混濁などがないことを確認してから加えてください。ボルテックス、ソニケーション、水浴加熱など物理的な方法で溶解を早めることは可能です。

技術サポート

ストックの作り方、阻害剤の保管方法、細胞実験や動物実験の際に注意すべき点など、製品を取扱う時に問い合わせが多かった質問に対しては取扱説明書でお答えしています。

Handling Instructions

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よくある質問（FAQ）

質問1:
I want to use it for i.p. injection, can you advise how to dissolve this compound?

回答
It can be dissolved in 2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O at 5 mg/ml as a clear solution. After stayed for a while, the precipitation will go out. So it is recommended to prepare the solution just before use.

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Cell Lines	Assay Type	Incubation Time	活性情報	PMID
HEK293T	Function assay	22 hrs	Inhibition of porcupine in HEK293T cells transfected with Wnt3A-expressing vector assessed as suppression of Wnt/beta-catenin signaling after 22 hrs by Super-top flash reporter gene assay, IC50 = 1 nM.	29630366
HT1080	Function assay		Inhibition of porcupine activity (unknown origin) expressed in human HT1080 cells assessed as suppression of Wnt3A-mediated super top flash activity by STF luciferase assay, IC50 = 0.074 nM.	26522946
A673	qHTS assay		qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay		qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
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In Vitro
In vitro	Wnt-C59 (C59) is claimed to inhibit PORCN enzyme activity at nanomolar concentrations. At 10 nM, it blocks the palmitoylation-dependent Wnt–WLS interaction in HeLa cells transfected with either WNT3A-V5 or WNT8A-V5 plasmids. This compound (100 nM) prevents incorporation of palmitate into WNT3A in HeLa cells transfected with WNT3A-V5, consistent with inhibition of PORCN activity. It (100 nM) inhibits the activity of all splice variants of murine PORCN in PORCN-null HT1080 cells transfected with PORCN. Wnt-C59 is a nanomolar inhibitor of mammalian PORCN acyltransferase activity and blocks activation of all evaluated human Wnts. It does not significantly inhibit the proliferation of any of 46 tested cancer cell lines in vitro at concentrations that completely inhibit PORCN. ^[1] Wnt-C59 is capable to significantly inhibit proliferation and comparable to the ICG-001 treated NMuMG (NMG) cells. It inhibits sphere formation by threefold in NMuMG (NMG) cells, which is dependent on Wnt10b-secretion. This compound inhibits proliferation of human MDA-MB 231 cells by >50%. ^[2] As a Porcupine inhibitor, it blocks radiolabel incorporation of [¹²⁵I]iodo-pentadecanoate in mouse L-Wnt3a cells transfected with Flag-Porcupine. ^[3]
細胞実験	細胞株	NMuMG (NMG) and MDA-MB 231 cells
濃度	--
反応時間	48 hours
実験の流れ	Seed cells at a concentration of 4×10³/well in 100 μL culture medium containing various amounts of Wnt-C59 (C59). Incubate cells for 48 hours at 37 ℃. Add 10 μL/well cell proliferation reagent and incubate for 4 hours at 37 ℃. Shake thoroughly for 1 min on a shaker. Measure the absorbance of the samples in a microplate (ELISA) reader.
実験結果図	Methods	Biomarkers	結果図	PMID
Western blot	β-catenin / pPKC		26941358
Q-PCR	Cyclin D1		31156379
Growth inhibition assay	Cell proliferation Cell viability		25980501

In Vivo
In Vivo	Wnt-C59 (C59) concentration remains greater than 10-fold above the in vitro IC50 for at least 16 hours following a single oral dose (5 mg/kg) in mice. At 10 mg/kg, it prevents growth of MMTV-WNT1 tumors in female nude mice orthotopically transplanted with independent MMTV-WNT1 tumors. This compound also decreases Wnt pathway activity and proliferation in such tumors, as evident by reduced expression of β-catenin target genes. ^[1] When topically administered at 10% for 4 weeks, it reduces the size of dysplasia in SmoM2-expressing cells in adult K14CREER/Rosa–SmoM2 mice. ^[4]
動物実験	動物モデル	Female nude mice orthotopically transplanted with independent MMTV-WNT1 tumors
投与量	10 mg/kg
投与経路	orally

臨床試験 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2024-05-22)
NCT Number	Recruitment	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
NCT02679001	Completed	Rheumatoid Arthritis	Hoffmann-La Roche	March 24 2016	--

参考
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23188502/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23307470/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23416332/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23178882/ + 展開

分子量	379.45	化学式	C₂₅H₂₁N₃O
CAS No.	1243243-89-1	SDF	Download Wnt-C59 (C59) SDFをダウンロードする
Smiles	CC1=NC=CC(=C1)C2=CC=C(C=C2)CC(=O)NC3=CC=C(C=C3)C4=CN=CC=C4
保管	3年-20°C粉	溶液の保管冷凍と解凍の繰り返しを避けるため小分けにしてください	1年-80°Cin solvent
１ケ月-20°Cin solvent

質量	濃度	体積	分子量
=	×	×

Selleck

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投与溶液組成計算機

輸送温度: 粉常温
溶液-15°C～-20°C
※上記輸送温度での製品の品質を保証します

製品は試験研究用のみを目的として販売されています。
医療用、家庭用、その他試験研究以外の用途には使用できません。

納期
国内在庫品：受注日の翌日（15時までの受注分）
＊北海道、九州、沖縄への配送は受注日より２日以上を要する場合あり
海外在庫品：受注後１〜２週間

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

in vivo Batch: Add solvents to the product individually and in order.				投与溶液組成計算機
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG 300 2 5%Tween80 3 50% ddH2O この製剤はselleckのラボで検証済みです。上記の溶解方法がご要望を満たさない場合、selleckの営業担当までお問い合わせ頂ければ、個別の試験を行います。	3.800mg/ml (10.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 76 mg/ml clear DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5%DMSO 1 95% Corn oil この製剤はselleckのラボで検証済みです。上記の溶解方法がご要望を満たさない場合、selleckの営業担当までお問い合わせ頂ければ、個別の試験を行います。	3.800mg/ml (10.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 76 mg/mL clarified DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG 300 2 5%Tween80 3 50% ddH2O この製剤はselleckのラボで検証済みです。上記の溶解方法がご要望を満たさない場合、selleckの営業担当までお問い合わせ頂ければ、個別の試験を行います。	3.800mg/ml (10.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 76 mg/ml clear DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.