D-Luciferin Potassium Salt

D-Luciferin Potassium Saltは、ホタルが発する特徴的な黄緑色の光の生成を触媒する酵素ルシフェラーゼ(Luc)の天然基質です。この反応による560 nmの化学発光は数秒以内にピークに達し、基質であるルシフェリンが過剰に存在する場合、光出力はルシフェラーゼ濃度に比例します。ルシフェラーゼ(luc)遺伝子は、研究や薬剤スクリーニングに広く利用されているレポーター遺伝子です。化学発光技術は実質的にバックグラウンドフリーであるため、lucレポーター遺伝子は低レベルの遺伝子発現を検出するのに理想的です。遺伝子発現のレポーターとしての役割に加え、ルシフェラーゼはATPの極めて高感度なアッセイにも一般的に使用されています。

D-Luciferin Potassium Salt化学構造

CAS No. 115144-35-9

サイズ 価格(税別) 在庫状況
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代表番号: 045-509-1970|電子メール:sales@selleck.co.jp
よく尋ねられる質問

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製品安全説明書

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Dyes阻害剤の選択性比較

生物活性

製品説明 D-Luciferin Potassium Saltは、ホタルが発する特徴的な黄緑色の光の生成を触媒する酵素ルシフェラーゼ(Luc)の天然基質です。この反応による560 nmの化学発光は数秒以内にピークに達し、基質であるルシフェリンが過剰に存在する場合、光出力はルシフェラーゼ濃度に比例します。ルシフェラーゼ(luc)遺伝子は、研究や薬剤スクリーニングに広く利用されているレポーター遺伝子です。化学発光技術は実質的にバックグラウンドフリーであるため、lucレポーター遺伝子は低レベルの遺伝子発現を検出するのに理想的です。遺伝子発現のレポーターとしての役割に加え、ルシフェラーゼはATPの極めて高感度なアッセイにも一般的に使用されています。
In Vitro
In vitro

1.Example protocol for in vitro bioluminescent image assays
a) Prepare a 100 mM (100-200X) Luciferin stock solution in sterile water. Mix well. Use immediately, or make single use aliquots, and store at -20℃, avoid freeze-thaw cycles, avoid exposure to the light.
b) Prepare a 0.5-1 mM working solution of D-Luciferin in pre-warmed tissue culture medium.
c) Aspirate media from cultured cells.
d) Add Luciferin working solution to cells, and incubate the cells for 5-10 minutes at 37℃ just prior to imaging.
2.Example protocol for in vivo bioluminescent image assays
a) Prepare a 15 mg/mL Luciferin stock solution in DPBS, without Mg2+ and Ca2+. Mix well.
b) Filter sterilizes the solution through a 0.2 μm filter. Use immediately, or make single use aliquots, and store at -20℃, avoid freeze-thaw cycles, avoid exposure to the light.
c) Inject the luciferin intra-peritoneally (i.p.) 10-15 minutes before imaging at 150 mg/kg (or 10 μL/g of luciferin stock solution) of the animal body weight.
Note: A kinetic study of luciferin should be performed for each animal model to determine peak signal time.
3.Example protocol for luciferin reporter assays
a) Prepare a 100 mM Luciferin stock solution in sterile water. Use immediately, or make single use aliquots, and store at -20℃, avoid freeze-thaw cycles, avoid exposure to the light.
b) Prepare a 1 mM working solution of D-Luciferin with 3 mM ATP, 1 mM DTT and 15 mM MgSO4 in 25 mM tricine buffer pH 7.8.
c) Pipette 5-10 μLof cell lysate into a microplate. Use lysis reagent or buffer without lysate as a blank.
d) Prime luminometer with luciferin working solution.
e) Inject 200 μL of luciferin working solution with no delay and a 10 second integration time.

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25992288/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33485378/

化学情報

分子量 318.41 化学式

C11H7KN2O3S2

CAS No. 115144-35-9 SDF --
Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]
保管 3 years -20°C(in the dark) powder

In vitro
Batch:

Water : 39 mg/mL

DMSO : 5 mg/mL ( (15.7 mM); 吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Ethanol : Insoluble

モル濃度計算器

in vivo
Batch:

Add solvents to the product individually and in order.

投与溶液組成計算機

実験計算

モル濃度計算器

質量 濃度 体積 分子量

投与溶液組成計算機(クリア溶液)

ステップ1:実験データを入力してください。(実験操作によるロスを考慮し、動物数を1匹分多くして計算・調製することを推奨します)

mg/kg g μL

ステップ2:投与溶媒の組成を入力してください。(ロット毎に適した溶解組成が異なる場合があります。詳細については弊社までお問い合わせください)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計算結果:

投与溶媒濃度: mg/ml;

DMSOストック溶液調製方法: mg 試薬を μL DMSOに溶解する(濃度 mg/mL, 注:濃度が当該ロットのDMSO溶解度を超える場合はご連絡ください。 )

投与溶媒調製方法:Take μL DMSOストック溶液に μL PEG300,を加え、完全溶解後μL Tween 80,を加えて完全溶解させた後 μL ddH2O,を加え完全に溶解させます。

投与溶媒調製方法:μL DMSOストック溶液に μL Corn oil,を加え、完全溶解。

注意:1.ストック溶液に沈殿、混濁などがないことをご確認ください;
2.順番通りに溶剤を加えてください。次のステップに進む前に溶液に沈殿、混濁などがないことを確認してから加えてください。ボルテックス、ソニケーション、水浴加熱など物理的な方法で溶解を早めることは可能です。

技術サポート

ストックの作り方、阻害剤の保管方法、細胞実験や動物実験の際に注意すべき点など、製品を取扱う時に問い合わせが多かった質問に対しては取扱説明書でお答えしています。

Handling Instructions

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