H2DCFDA (DCFH-DA)

別名:2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate

H2DCFDA (DCFH-DA) is a cell-permeable probe used to detect intracellular reactive oxygen species (ROS) production. It is de-esterified intracellularly and turns to highly fluorescent 2′,7′-dichlorofluorescein upon oxidation. It is used in sensitive and rapid quantitation of oxygen-reactive species in response to oxidative metabolism; microplate assay for detecting oxidative products in phagocytic cells, and quantitative multiwell myeloid differentiation assay.(Ex/Em=488/525 nm)

H2DCFDA (DCFH-DA)化学構造

CAS No. 4091-99-0

サイズ 価格(税別) 在庫状況
10mM (1mL in DMSO) JPY 19200 国内在庫あり
JPY 15900 国内在庫あり
JPY 33200 国内在庫あり

代表番号: 045-509-1970|電子メール:[email protected]
よく尋ねられる質問

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ROS阻害剤の選択性比較

生物活性

製品説明 H2DCFDA (DCFH-DA) is a cell-permeable probe used to detect intracellular reactive oxygen species (ROS) production. It is de-esterified intracellularly and turns to highly fluorescent 2′,7′-dichlorofluorescein upon oxidation. It is used in sensitive and rapid quantitation of oxygen-reactive species in response to oxidative metabolism; microplate assay for detecting oxidative products in phagocytic cells, and quantitative multiwell myeloid differentiation assay.(Ex/Em=488/525 nm)
Targets
ROS [1]
In Vitro
In vitro

1. H2DCFDA is dissolved in DMSO to obtain a 10 mM stock solutions and further diluted before use.
2. Cells are incubated with 5 μM H2DCFDA solution in PBS in the dark for 30 min at 37°C, then harvested with 0.05% trypsin-EDTA solution, suspended in a fresh medium, and immediately analyzed with flow cytometer.
3. Along with the H2DCFDA probe, if indicated, use ROS-insensitive modification of the fluorescein dye DCFDA as a positive control. The staining procedure is the same as for the H2DCFDA。
Emission (Em)=517 Excitation (Ex)=492 517

細胞実験 細胞株 hCECs
濃度 10 μM
反応時間 30 min
実験の流れ

Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye 2'7'-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without DCFH-DA are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

化学情報

分子量 487.29 化学式

C24H16Cl2O7

CAS No. 4091-99-0 SDF --
Smiles CC(=O)OC1=CC2=C(C=C1Cl)C(C3=C(O2)C=C(OC(C)=O)C(=C3)Cl)C4=C(C=CC=C4)C(O)=O
保管 3 years -20°C(in the dark) powder

In vitro
Batch:

DMSO : 97 mg/mL ( (199.06 mM); 吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Ethanol : 7 mg/mL

Water : Insoluble

モル濃度計算器

in vivo
Batch:

Add solvents to the product individually and in order.

投与溶液組成計算機

実験計算

モル濃度計算器

質量 濃度 体積 分子量

投与溶液組成計算機(クリア溶液)

ステップ1:実験データを入力してください。(実験操作によるロスを考慮し、動物数を1匹分多くして計算・調製することを推奨します)

mg/kg g μL

ステップ2:投与溶媒の組成を入力してください。(ロット毎に適した溶解組成が異なる場合があります。詳細については弊社までお問い合わせください)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計算結果:

投与溶媒濃度: mg/ml;

DMSOストック溶液調製方法: mg 試薬を μL DMSOに溶解する(濃度 mg/mL, 注:濃度が当該ロットのDMSO溶解度を超える場合はご連絡ください。 )

投与溶媒調製方法:Take μL DMSOストック溶液に μL PEG300,を加え、完全溶解後μL Tween 80,を加えて完全溶解させた後 μL ddH2O,を加え完全に溶解させます。

投与溶媒調製方法:μL DMSOストック溶液に μL Corn oil,を加え、完全溶解。

注意:1.ストック溶液に沈殿、混濁などがないことをご確認ください;
2.順番通りに溶剤を加えてください。次のステップに進む前に溶液に沈殿、混濁などがないことを確認してから加えてください。ボルテックス、ソニケーション、水浴加熱など物理的な方法で溶解を早めることは可能です。

技術サポート

ストックの作り方、阻害剤の保管方法、細胞実験や動物実験の際に注意すべき点など、製品を取扱う時に問い合わせが多かった質問に対しては取扱説明書でお答えしています。

Handling Instructions

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